PCR en tiempo real. Una de las mejores herramientas moleculares.

Desde que el controvertido premio nobel Kary Mullis en 1986 describió la PCR (Polymerase Chain Reaction), poderosa herramienta en biología molecular, sin la cual no se hubiesen logrado avances en la ciencia tales como el proyecto genoma humano, el descubrimiento de genes asociados a enfermedad, y la identificación de nuevos agentes infecciosos; tal vez el mayor avance que se ha logrado es el desarrollo de la real time PCR o PCR en tiempo real ( rT-PCR, qRT-PCR, PCRrt).

http://www.dnsffaa.gub.uy/GCU/adn3.gifLa reacción de PCR en si, se refiere a la amplificación enzimática de un fragmento de ácido nucleico (DNA o RNA). El montaje de una PCR tradicional requieren tres partes: extracción y purificación del DNA o RNA (Pre-PCR), la amplificación o PCR en si (anidada, múltiplex, asimétrica, asociada a transcripción reversa, etc…), y la visualización (post-PCR). Es decir, una vez finalizada la amplificación (PCR) como tal, se deben realizar diferentes procesos para hacer la detección y/o cuantificación de los productos de amplificación (amplicones), por lo que este tipo de reacción se considera de punto final, presentado algunas desventajas.

En la búsqueda de una reacción que permitiera cuantificar la cantidad de ácidos nucleicos al tiempo que se realizaba su amplificación, se desarrolló la rT-PCR, denominada en principio PCR cinética (Higuchi, 1993).

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Virus, un reto para la taxonomía

http://micro.magnet.fsu.edu/cells/viruses/images/bacteriophage.jpgLa virología, una ciencia relativamente joven pero cuyo avance en los últimos 20 años ha sido vertiginoso, ha ido revelando muchas de las característica de estos seres, los virus; algunos dan una definición simple, un ácido nucleico envuelto en proteínas, otros los han definido como la brecha entre lo inerte y lo vivo.

A través del estudio de los virus se han revaluado varias teorías consideradas casi dogmas en las ciencias:

  • El DNA es la única molécula que puede contener la información genética, después del descubrimiento de los virus RNA este concepto tuvo que cambiarse.
  • La información génetica fluye de DNA-RNA-Proteínas, también gracias al descubrimiento de los retrovirus se comprobó que puede fluir en sentido de RNA-DNA y/o RNA-proteína directamente.

Esta área de las ciencias ha resultado un desafío para nosotros, acostumbrados a clasificar. Esta es la tarea del International Committee for Taxonomy of Viruses (ICTV). La cual considera a los virus como biosistemas elementales con algunas características de los seres vivos, esto es:

  1. Los virus tienen genes, se replican, evolucionan, se adaptan a los hospederos y al ambiente, sin embargo, no pueden generar, capturar y almacenar energía, por lo que no son funcionales fuera de las células hospederas.
  2. Aunque son patógenos, no se pueden considerar microorganismos patógenos, ya que no son seres vivos.
  3. Un virus pasa a ser parte de un sistema vital cuando infecta una célula y su material genético se integra a esta. [Read more →]


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